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原代培養(yǎng)技術(shù)的注意事項(xiàng)

2023-12-08 瀏覽次數(shù):1126

一、注意污染

1、嚴(yán)格進(jìn)行動(dòng)物皮膚消毒,使用三套器械取材。新生動(dòng)物皮膚先用2%碘酒液消毒,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。

2、嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染,避免化學(xué)物質(zhì)污染。自取材開始,保持所有組織細(xì)胞處于無菌條件。細(xì)胞計(jì)數(shù)可在有菌環(huán)境中進(jìn)行。

3、吸取液體前,瓶口和吸管進(jìn)行火焰消毒;吸取液體時(shí),避免瓶口和吸管碰撞。

4、離心管入臺(tái)前,管口、管壁應(yīng)消毒。

5、實(shí)驗(yàn)者離開超凈臺(tái)時(shí),要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。

6、使用過的器械用酒精棉球擦去血污后,移入另一個(gè)器皿中繼續(xù)消毒,在浸泡器械時(shí)剪刀口要叉開放,鑷子彎頭要向下放,并加蓋消毒。凡在超凈臺(tái)外操作的步驟,各器皿需用蓋子或橡皮塞,以防止細(xì)菌落入。

二、器材使用時(shí)既要注意用火焰消毒,又要防止?fàn)C傷、燙死細(xì)胞。經(jīng)火焰消毒后的吸管一定要用Hanks液冷卻。

三、超凈臺(tái)內(nèi)溫度、濕度較大,在夏天工作時(shí)臺(tái)內(nèi)散熱更慢,因此進(jìn)行細(xì)胞懸液混勻、接種時(shí),離火焰要稍微遠(yuǎn)些,組織細(xì)胞、培養(yǎng)液等不能暴露過久,以免溶液蒸發(fā)。

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