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細胞培養(yǎng)生長減慢和死亡的原因

2022-11-07 瀏覽次數(shù)：1984

培養(yǎng)細胞生長減慢這種情況可能的原因包括：

1．由于更換了不同培養(yǎng)液或血清，細胞需要重新適應。

2．試劑保存不當，培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。

3．培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。

4．接種細胞起始濃度太低。

5．細胞已老化。

6．支原體污染。

建議解決方法：

1．比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液。

2換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補加谷氨酰胺及生長因子。

3．用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，更換培養(yǎng)物。

4．培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清培養(yǎng)液在2-8℃保存，并在2周內(nèi)用完。

5．增加接種細胞起始濃度。

6．換用新的保種細胞。

7.隔離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，更換新的培養(yǎng)物。

培養(yǎng)細胞死亡的原因：

常見的可能原因是細胞傳代時，消化過度，細胞嚴重受傷。如經(jīng)驗不足，細胞傳代消化時，在顯微鏡下觀察，至細胞變圓、脫壁，加入含血清的培養(yǎng)液，終止消化。其他原因包括長途運輸，細胞在不適宜的溫度下時間過長；培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分消耗殆盡，沒有及時換液。如果原來細胞狀態(tài)較好，換液后細胞死亡，應考慮是培養(yǎng)液及血清的質(zhì)量。-好事先已證明培養(yǎng)液及血清質(zhì)量良好。