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技術(shù)文章 / article
凍存細(xì)胞時,有必要緩凍嗎?
2022-03-11 瀏覽次數(shù):1487
一、我們先來說說何為緩凍:
緩凍即為凍存細(xì)胞時,要程序降溫——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 過夜,次日投入液氮內(nèi)。
二、那為什么要進(jìn)行緩凍呢?
其實(shí)所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過程中需要程序降溫。
傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO及基礎(chǔ)培養(yǎng)基等組分組成。凍存保護(hù)的DMSO組分,在進(jìn)入細(xì)胞后結(jié)合細(xì)胞內(nèi)部的水份,降低冰點(diǎn),防止細(xì)胞在冷凍過程中形成冰晶對細(xì)胞造成損害。
但是DMSO只能在細(xì)胞內(nèi)部保護(hù)細(xì)胞,細(xì)胞外部沒有保護(hù),水結(jié)冰晶會在細(xì)胞膜外部受到損傷,為了防止冰晶過大,使用時必須采用程序降溫的方式,才可保證細(xì)胞復(fù)蘇的成功率(80%以上)。
若不采用程序降溫的形式,有些凍存的細(xì)胞,甚至復(fù)蘇成功率為0。
三、無血清細(xì)胞凍存液幫您輕松凍細(xì)胞!
無血清細(xì)胞凍存液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。
一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,HAKATA無血清細(xì)胞凍存液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。