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胎牛血清的常見(jiàn)問(wèn)題匯總

2022-02-15 瀏覽次數(shù):1265

1. 血清的保存溫度?

未拆封的血清應(yīng)保存在-15℃至-20℃,避免反復(fù)凍融。拆封后的血清應(yīng)無(wú)菌分裝成適當(dāng)?shù)挠昧坎⒋娣庞?-15 ℃ 至 -20 ℃,2~8 ℃ 溶解后建議一個(gè)月內(nèi)使用。

2. 血清的有效期是多久?

大部分血清效期是 5 年,針對(duì)每個(gè)批次,請(qǐng)通過(guò)質(zhì)檢文件確定具體效期日期。

3. 血清應(yīng)如何融解?

血清從冷凍箱取出后,置于2~8℃冰箱使之融解,不時(shí)規(guī)則地?fù)u晃均勻,充分融解后分裝或使用。

4. 為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)沉淀?是否需要去除?如何去除?

血清中的白色沉淀主要是脂蛋白、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白、磷酸鈣、膽固醇等、絮狀沉淀物主要是纖維蛋白。多種原因可能導(dǎo)致血清中沉淀的形成,常見(jiàn)的原因之一是融化過(guò)程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量。若需要去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)檠逯械男鯛钗飼?huì)阻塞過(guò)濾膜。

5. 血清是否需要做滅活處理?

血清是否需要滅活取決于您的應(yīng)用。加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES 細(xì)胞,昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

滅活過(guò)程中,會(huì)導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長(zhǎng)因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清有特殊要求時(shí),才會(huì)考慮對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。常見(jiàn)的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白,因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過(guò)程,所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。

6. 如何進(jìn)行血清滅活處理?

血清請(qǐng)先按上述「血清應(yīng)如何融解」中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時(shí)請(qǐng)將血清置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對(duì)血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過(guò)大。最好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計(jì),加熱過(guò)程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到 56 ℃ 左右,開(kāi)始計(jì)時(shí)。56 ℃ 水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。

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