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技術(shù)文章 / article
HAKATA16010-159新生牛血清出廠檢測
2017-06-06 瀏覽次數(shù)：1267
HAKATA16010-159新生牛血清通常作為補充成分添加在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)使用。它能夠提供各種大分子蛋白，小分子量營養(yǎng)，水溶性成分的轉(zhuǎn)運蛋白，和其它一些細胞在體外所必需的成分，如激素和附著因子。血清可以結(jié)合或中和一些生長因子中的有毒成分，并提供培養(yǎng)基的緩沖能力。細胞培養(yǎng)時血清的添加依賴于基礎(chǔ)培養(yǎng)基的化學(xué)組成，培養(yǎng)細胞的類型，及所用的培養(yǎng)系統(tǒng)。
HAKATA16010-159新生牛血清出廠檢測是相當(dāng)嚴格的，產(chǎn)品的出廠檢測要經(jīng)過5道程序：
1.化學(xué)檢測
滲透壓：使用凝固點降低的方法檢測滲透壓。我們每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對我們的滲透壓檢測儀器進行校準(zhǔn)。
測定pH值：同樣每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對pH計進行校準(zhǔn)
電泳圖譜：鑒定血清的整體性質(zhì)。樣品被加到醋酸纖維素介質(zhì)中并在緩沖體系內(nèi)遷移。條帶經(jīng)染色、清潔、干燥后用密度儀進行掃描以檢測白蛋白和球蛋白組分的相對濃度。
氧合血紅蛋白檢測：為證實是否在適當(dāng)?shù)臈l件下進行采血和處理，使用修飾的Fleming方法對血紅蛋白進行分光光度檢測。
血清總蛋白檢測：隨著動物年齡的增加血清總蛋白含量也相應(yīng)地增加。使用自動化的Biuret方法進行總蛋白的測定以確證動物年齡。
2.免疫球蛋白的檢測
HAKATA用高敏感度及高專一性的ELISA方法，來測定胎牛血清的免疫球蛋白G含量。
3.微生物檢測
使用美國藥典版推薦的方法進行微生物的檢測以確定無細菌和真菌的污染。
所有的血清都使用Barile & Kern的大體積方法檢測支原體。收集的樣品至少在肉湯中培養(yǎng)個星期，同時要進行至少4個在瓊脂平板上的亞培養(yǎng)。瓊脂平板在有氧和厭氧條件下36℃保溫，每周進行一次微生物檢驗。使用Dienes染色的方法進行支原體菌落的檢測。對接種的肉湯要定期進行濁度和pH值變動的檢測。同時，所有的血清也要使用Hoechst 熒光DNA染色的方法進行不可在肉湯中培養(yǎng)的支原體篩查。
4.病毒檢測
HAKATA血清嚴格按照美國聯(lián)邦法規(guī)Title9CFR, Part 113.53中關(guān)于動物來源產(chǎn)品成分的要求來進行病毒的檢測。
雖然HAKATA法保證所有的血清均無潛在的病毒污染，但我們可以保證所有的血清均經(jīng)過完整的病毒檢測，符合美國細胞培養(yǎng)制品的產(chǎn)品管理要求。血清是由動物身上所采集的生物制品，而這些動物身上或許帶有病毒，因此病毒檢測便是要偵測血清中是否含有可能影響細胞株的病毒。地方性的病毒如非細胞病理性的BVD病毒可能存在于某批血清中，這批血清就不能培養(yǎng)對此病毒敏感的細胞。
5.穩(wěn)定性檢測程序
在不同的時間間隔對產(chǎn)品進行檢測，以確定在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下*的zui長期限。
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