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技術(shù)文章 / article
細(xì)胞培養(yǎng)所需要的條件 蒂科生物
2017-02-05 瀏覽次數(shù):1973
一,實驗室設(shè)計
細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物和不受其他有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作去設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。
二,常用設(shè)施設(shè)備
1,超大工作臺:也稱凈化工作臺,分為側(cè)流式,直流式和外觀式三大類。
2,無菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等。
3、操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物
4、洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。
5、分析間:顯微鏡、計算機打印機等。
三,培養(yǎng)器皿
常用的細(xì)胞培養(yǎng)器有培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿等。常準(zhǔn)備量是使用量的三倍。器皿應(yīng)選擇透明度好、無毒、利于細(xì)胞黏附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中興硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。
1、液體儲存瓶:用于儲存各種配置好的培養(yǎng)液、血清等液體,常用規(guī)格有500ml、250ml、100ml、等幾種。
2、培養(yǎng)瓶:根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞種類要求不同培養(yǎng)瓶的形態(tài)各異,用于傳代培養(yǎng)的細(xì)胞要求瓶壁厚薄均勻,便于細(xì)胞貼壁生長和觀察,瓶口要大小一致,口徑一般不小于1cm,允許吸管伸入瓶內(nèi)任何部位,規(guī)格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml,等幾種。
3 、培養(yǎng)皿:用于開放式培養(yǎng)及其他用途。分直徑30mm,60mm,120mm,等幾種。
4、吸管:常用的有長吸管和短吸管兩類,長吸管也稱刻度吸管。其改良后管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用于移動液體。常用1m1和10m1兩種。短吸管也叫滴管,分彎頭和直頭兩種。
5 、離心管:離心管是細(xì)胞培養(yǎng)中使用zui廣泛的器皿,根據(jù)用途不同形態(tài)各樣,常用于細(xì)胞培養(yǎng)的離心管有腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類。前者分別為50ml 、30ml 、15ml;后者則多為10ml和5ml。
6 、其他:如三角燒瓶 、燒杯 、量筒 、漏斗 、注射器等。